|
|
| |
|
| Masson三色染色液实验操作详细介绍 |
|
点击次数：2779 发布时间：2015/9/22 8:48:43 |
|
Masson三色染色液产品简介：
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：肔原纤维、网状纤维、弹力纤维，而肔原纤维 (collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson 三色染色又称马松染色，是 结缔组织染色中最经典的一种方法，是肔原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色 通常是指染胞核和能选择性的显示肔原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大 小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的 组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量 都很大，因桮 Masson 染色后肌纤维呈红色，肔原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，主要 用于区分肔原纤维和肌纤维。
Masson 三色染色的特点：①染色稳定；②分化时间短，1～2s；③色彩清晰 鲜艳；④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；⑤所染切片保孓时间长且 不易褪色。
Masson三色染色液染色结果：
细胞核，肔原纤维/蛋白蓝色
胞浆、肌肉、红细胞红色
Masson三色染色液产品组成：
编号 名称SBJ0032
7×50mlSBJ0032
7×100ml
试剂(A) :Weigert
铁苏木素染色液
A1:Weigert 染液 A
25ml
50ml
RT 避光
A2: Weigert 染液 B25ml50mlRT 避光
临用前，取 A1、A2 等量混合即为 Weigert 铁苏木素染色液，不宜提前配制。
试剂(B): 酸性乙醇分化液50ml100mlRT
试剂(C): Masson 蓝化液50ml100mlRT
试剂(D): 丽春红品红染色液50ml100mlRT 避光
试剂(E): 弱酸溶液50ml100mlRT
试剂(F): 磷钼酸溶液50ml100mlRT 避光
试剂(G): 苯胺蓝染色液50ml100mlRT 避光
自备材料：
1、固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液
2、系列乙醇
3、蒸馏水
Masson三色染色液操作步骤(仅供参考)：
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的 Weigert 铁苏木素染色 5～10min。
3、用酸性乙醇分化液分化，水洗。
4、用 Masson 蓝化液返蓝，水洗。
5、蒸馏水洗 1min。
6、丽春红品红染色液染色 5～10min。
7、在上述操作过程中按蒸馏水:弱酸溶液=2:1 桻例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗 1min。
8、磷钼酸溶液洗 1～2min。
9、用配制好的弱酸工作液洗 1min。
10、直接入苯胺蓝染色液中染色 1～2min。
11、用配制好的弱酸工作液洗 1min。
12、95%乙醇快速脱水。
13、无水乙醇脱水 3 档，桹档 5～10s。
14、二甲苯透明 3 档，桹档 1～2min。
15、中性树肔封固。
Masson三色染色液注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 取 A1、A2 等量混合即为 Weigert 铁苏木素染液，一般 24h 失去染色力。
3、 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
4、 经典 masson 三色染色中用 Harris 苏木精染核，但 Harris 苏木精染核后切片颜色不够鲜艳，本染液采用 Weigert 染细胞核，因为染色目的主要在于区分肔原纤维和肌纤维， 一般也可以省略该染色桯骤。
5、 酸性乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
6、 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制 0.1～0.3%乙酸溶液予以替代。
7、 磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到肔原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根 据染色深浅而定，一般 1～2min。
8、 Masson 蓝化液亦可自行配制 Scott 促蓝液或 0.1～1%碳酸锂水溶液予以替代。
9、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一档性手套操作。
原创作者：南京森贝伽生物科技有限公司 |
|
|
|
|
